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第1041章 许秋出手!完美的科研步骤!(2 / 2)

毕竟能见到许秋这种科研大佬做实验……这无异于顶尖手术对于临床医生的吸引力!

……

很快,一片实验室就被清空出来。

所有的材料、设备,都供许秋一人使用。

莫雷蒂、埃米尔等人亲自打下手。

而其余人,则在不远处翘首以盼,一个个目中都充满了期待,恨不得把眼珠子黏在许秋身上。

“第一步,抗原暴露。”

许秋的动作很快。

他手法老练,对不同步骤的处理也非常娴熟。

先是进行热灭活。

活菌悬液,五十六度水浴。

这个温度的水浴,就足以杀死嗜沫凝聚杆菌了。

随后,加入β-巯基乙醇。

最终浓度来到10mm。

“加入β-巯基乙醇,是为了破坏二硫键。

“先前提到,活菌表面有荚膜多糖,抗原表位被遮蔽。

“实际上更具体一点,嗜沫凝聚杆菌外膜蛋白ompa,正是通过二硫键与荚膜多糖交联,遮蔽下方的脂多糖表位。

“也就是说遮蔽抗原表位的,其实就是膜蛋白复合物,而这些蛋白就通过二硫键维持空间结构的稳定。”

完整二硫键维持的天然构象,会阻止抗体fab段接近抗原表位。

因而,才根本没法发生结合。

此时众人脸上都露出惊色。

不少人都不由得感慨。

埃米尔更是觉得羞愧万分。

亏他自己还是所谓的国际教授……

自己听完许秋的猜想之后,竟然打算直接用热灭活菌液直接做实验……

这也能成功。

但,效果和许秋如今的处理手法,却千差万别!

毕竟,热灭活,只能杀死表面的荚膜多糖。

而二硫键却还是会阻碍结合。

“不只是如此!”

这时候,段善继开口。

作为神经免疫学专家的他,看到了更多的东西。

他带着惊叹开口,道:“单纯做热灭活,后续要进行物理裂解,很有可能因为剧烈破碎破坏抗原表位,导致能发生结合的抗原表位减少……

“但许秋的做法,热灭活属于物理处理、β-巯基乙醇的则是化学还原……物化协同,反应温和,可以保留发生反应的脂多糖构象,从而确保抗体识别天然表位!”

若是要给个更精确的数据的话……

埃米尔的做法,od值可能只有0.5左右,而许秋的做法,能将关键表位暴露提升信号10倍以上!

但凡有一点能结合的抗原表位,都不会遗漏!

可以说,堪称完美实验了。

“的确如此……”埃米尔思索过后,郑重点头。

再看向许秋的目光,越发的复杂了。

而此刻,其余人也是极为专注,继续关注着许秋接下来的动作。

……

热灭活菌液制备完毕后,许秋将其与等体积的包被缓冲液混合。

随后离心,去除不溶性碎片,取上清用于elisa包被……

最终,到了最关键的一步——

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