MiRNA全称是MicroRNA,也就是微小RNA,要证明其可以通过HK2基因从而影响到HK2蛋白的表达,就需要进行证明。
要知道,HK2是细胞获得能量的关键,也是葡萄糖能够被细胞利用产生能量的第一个步骤的关键酶。
大致的实验流程,大概可以分成以下几步。
第一步就是构建过表达MiRNA143的细胞系,也就是将含有大量MiRNA143的基因片段,转入到骨肿瘤细胞中,使得其MiRNA143量增加,假如其可以阻断HK2的活性,那么骨肉瘤细胞必然会存在能量供应不足的情况。
没有能量供应的骨肉瘤细胞必将会像是不吃饭的人一样,连基本的生存的都成了问题,怎么去造人?
哦不,是造细胞。
假如其可以促进HK2的活性,那么骨肉瘤细胞必然会存在能量供应充足,有了能量的情况下,那就相当于磕了“万艾可”,遍地撒种子,通宵打蛋完全不在话下,无限扩展,无限嚣张,到处而是二代……
同时,也要构建Si-MiRNA143的细胞系。SIRNA的全称是SmallinterferingRNA,也就是小干扰RNA,之所以有SIRNA这个名字就是它最先发现的人是外国人,母语是英文。
否则的话,它可能全称就变成了‘xiaoganraoRNA’,缩写可以写成XGRRNA。
这种干扰RNA的作用,也就是把肿瘤细胞中的小RNA的表达给阻滞掉,使得其少表达甚至是不表达。
这样就形成了和过表达小干扰RNA143相反的作用,这是对照组之一。
还有就必须要做空白的对照,那就是不做处理的骨肉瘤细胞,叫空白对照。
观察以上处理组和观察组的骨肉瘤细胞的生长情况,分别于对照组和空白对照组作一个对比,使得明眼人就能够看得出来他们之间的差异,从而佐证小干扰RNA143在肿瘤中的作用。
这是实验设计的情况。
再接下来,会通过测定其中葡萄糖和乳酸的含量,来初步检测各个组中骨肿瘤的活性。
因为葡萄糖必然是所有细胞能量代谢的基础,在培养瓶里,一定容积的葡萄糖是有限且等量的,消耗的多的,那么这个组的活性就越强,消耗越少的,活性就越弱。
而乳酸,则是葡萄糖通过了能量代谢之后的一个产物,产物越多,代表活性就越强,产物越少,活性越弱。
只要搞清楚这些原理,其实实验结果一展示出来,只要是个会认字的人就能够看懂。
科研并不是高大上的,让人不懂的,反而,每一个成果最终的展示,最好的目的就是能够让傻瓜都知道它的结果是这样子的,本质是揭秘……
……
搞清楚了这些之后,陆成就开始着手转染骨肉瘤细胞制作细胞系了。
过表达细胞系和沉默组细胞系虽然都会用到转染的步骤,但是转染的载体的选择,也是有一定细微的差异的……
陆成把准备工作都做好了之后,实验室里的一个学姐就看到了,然后问陆成说:“亲爱的陆,听说你现在是在做转染?”
陆成正在消毒操作所需的器械,听到就转头,看清楚来人正是凯瑟琳师姐,也是一个博士,传闻中实验室第二好看,第一车灯的那个美女师姐。